一、做完葡萄酒的缸子里面有一層白沫那是不是就是 酵酶

白沫的話(huà)是不是像氣泡似的，可能是酵母發(fā)酵產(chǎn)生二氧化碳所以會(huì)出現(xiàn)很多泡沫

二、酵母菌是一種常用的實(shí)驗(yàn)材料，某校學(xué)生利用酵母菌探究細(xì)胞呼吸方式和種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化．請(qǐng)回答下列問(wèn)題

（1）由以上分析可知，圖1中移動(dòng)的距離代表細(xì)胞呼吸消耗氧氣的量，酵母菌存在有氧呼吸時(shí)，紅色液滴向左移；圖2中紅色液滴移動(dòng)的距離代表細(xì)胞呼吸釋放的二氧化碳量與消耗氧氣量的差值，酵母菌存在無(wú)氧呼吸時(shí)，紅色液滴向右移．酵母菌細(xì)胞無(wú)氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳的場(chǎng)所是線(xiàn)粒體．

（2）研究“酵母菌種群數(shù)量變化”的實(shí)驗(yàn)中，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的方法是樣方法，計(jì)數(shù)時(shí)，一般是界定方格范圍中的酵母菌數(shù)量．進(jìn)行10倍稀釋的操作一般是取1mL原液加9mL的無(wú)菌水．

（3）培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量逐漸減少的原因有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗、代謝廢物積累、pH發(fā)生改變．

故答案為：

（1）左? 右?? 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線(xiàn)粒體

（2）樣方法?? 中? 取1mL原液加9mL的無(wú)菌水

（3）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗、代謝廢物積累、pH發(fā)生改變

三、微生物檢測(cè)-酵霉

菌落總數(shù)測(cè)定操作細(xì)則

菌落總數(shù)是指檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下培養(yǎng)后(如培基成分、培養(yǎng)溫度和時(shí)間、pH、需氧性質(zhì)等)，所得1mL(g)檢樣中所含菌落的總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判定檢樣被污染程度的標(biāo)志，也可以應(yīng)用這一方法觀(guān)察細(xì)菌在檢樣中繁殖的動(dòng)態(tài)，以便對(duì)被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù)。

1 設(shè)備和材料

1.1 溫箱：36±1℃。

1.2 冰箱：0～4℃。

1.3 恒溫水?。?6±1℃。

1.1 天平。

1.5 電爐

1.6 吸管。

1.7 廣口瓶或三角瓶：容量為500mL。

1.8 玻璃珠：直徑約5mm。

1.9 平皿：直徑為90mm。

1.10 試管。

1.11 放大鏡。

1.12 菌落計(jì)數(shù)器。

1.13 酒精燈。

1.14 均質(zhì)器或乳缽。

1.15 試管架。

1.16 滅菌刀或剪子。

1.17 滅菌鑷子。

2 培養(yǎng)基和試劑

2.1 營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：按GB 4789.28中4.7規(guī)定。

2.2 磷酸鹽緩沖稀釋液：按GB 4789.28中3.22規(guī)定。

2.3 生理鹽水。

2.4 75%乙醇。

3 操作步驟

3.1 檢樣稀釋及培養(yǎng)

3.1.1 以無(wú)菌操作，將檢樣25g(或mL)剪碎放于含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶?jī)?nèi)(瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成1∶10的均勻稀釋液。

3.1.2 用1mL滅菌吸管吸取1∶10稀釋液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)(注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液)，振搖試管，混合均勻，做成1∶100的稀釋液。

3.1.3 另取1mL滅菌吸管，按上條操作順序，做10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1mL火菌吸管。

3.1.4 根據(jù)檢樣衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計(jì)，選擇2～3個(gè)適宜稀釋度，分別在做10倍遞增稀釋的同時(shí)，即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。

3.1.5 稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時(shí)將涼至46℃營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46±1℃水浴保溫)注入平皿約15mL，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻。同時(shí)將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照

3.1.6 待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h。

3.2 菌落計(jì)數(shù)方法

做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀(guān)查，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。

3.3 菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告

3.3.1 平板菌落數(shù)的選擇

選取菌落數(shù)在30～300之間的平板作為菌落總數(shù)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板，應(yīng)采用兩個(gè)平板平均數(shù)，其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘2以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如有鏈狀菌落生長(zhǎng)時(shí)(菌落之間無(wú)明顯界線(xiàn))，若僅有一條鏈，可視為一個(gè)菌落；如果有不同來(lái)源的幾條鏈，則應(yīng)將每條鏈作為一個(gè)菌落計(jì)。

3.3.2 稀釋度的選擇

3.3.2.1 應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30～300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

3.3.2.2 若有兩個(gè)稀釋度，其生長(zhǎng)的菌落數(shù)均在30～300之間，則視兩者之比如何來(lái)決定。若其比值小于或等于2，應(yīng)報(bào)告其平均數(shù)；若大于2則報(bào)告其中較小的數(shù)字。

3.3.2.3 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

3.3.2.4 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

3.3.2.5 若所有稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

3.3.2.6 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30～300之間，其中一部分大于300或小于30時(shí)，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

3.3.3 菌落數(shù)的報(bào)告

菌落數(shù)在100以?xún)?nèi)時(shí)，按其實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值，以四舍五入方法計(jì)算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)，也可用10的指數(shù)來(lái)表示。